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DOI: 10.1016/j.reuma.2020.08.005
Disponible online el 13 de Octubre de 2020
Laboratory Diagnosis of ANCA-Associated Vasculitis (AAV) Using a Combination of Immunofluorescence Test (IIFT) and Line Immunoassay (LIA): Single-Centre Report From India
Diagnóstico de laboratorio de vasculitis asociada a ANCA (VAA), utilizando conjuntamente test de inmunofluorescencia (IIFT) e inmunoensayo lineal (LIA): Reporte de un único centro de la India
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Rajni Chauhana,b, Dharmendra Jaina, Aseem Kumar Tiwaria, Pranav Dorwala, Vimarsh Rainac, Shoma Paul Nandib,
Autor para correspondencia
spaul@amity.edu

Corresponding author.
a Molecular and Transplant Immunology Laboratory, Department of Transfusion Medicine, Medanta-The Medicity, Gurgaon, India
b Amity Institute of Biotechnology, Amity University Uttar Pradesh, Noida, India
c Chimera Transplant Research Foundation, New Delhi, India
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Table 1. Comparison of demographics among AAV diseases in IIFT positive patients (n=168).
Table 2. Comparison of organ involvement among AAV diseases in ANCA IIFT positive patients (n=168).
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Abstract
Introduction

Anti-neutrophil cytoplasmic autoantibodies (ANCA) associated vasculitis (AAV) is a small vessel vasculitis with insufficient epidemiological estimates in India. We aimed to determine demographic, clinical features, and laboratory diagnosis of AAV patients presenting to a large tertiary care centre in India.

Material and methods

1289 patient samples were screened for ANCA by indirect immunofluorescence test (IIFT) and confirmation of ANCA target antigens was done by line immunoassay. Association between IIFT and LIA was determined in AAV.

Results

By IIFT, ANCA was detected in 13.0% (168 out of 1289), of which 23.8% (40/168) were positive with P-ANCA pattern, 25.0% (42/168) were positive with C-ANCA and 47.6% (80/168) showed an atypical pattern. On evaluation with a line immunoassay, 6.7% (86/1289) were positive out of which 52.3% (45/86), 41.9% (36/86), 8.8% (6/86) were positive for anti-MPO, anti-PR3, and anti-GBM respectively. In eosinophilic granulomatosis with polyangiitis (EGPA) 87.5% (7/8), and microscopic polyangiitis (MPA/RLV) 91.3% (21/23), anti-MPO was the predominantly observed antibody. In granulomatosis with polyangiitis (GPA) anti-PR3 antibody was predominant in 87.5% (28/32) cases. Out of 168 IIF positive samples 8, 32, and 23 cases of EGPA, GPA, and MPA/RLV were observed respectively.

Conclusions

The primary aim of the study was to provide single-centre data to determine the laboratory diagnosis of AAV. A combination of IIFT and LIA was found to be an optimum testing strategy for the laboratory diagnosis of AAV.

Keywords:
ANCA associated vasculitis (AAV)
Anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA)
C-ANCA
P-ANCA. MPO
Resumen
Introducción

La vasculitis asociada a anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos –ANCA– (VAA) es una vasculitis de pequeños vasos con cálculos epidemiológicos insuficientes en India. Nuestro objetivo fue determinar las características demográficas y clínicas, y los diagnósticos de laboratorio de los pacientes con VAA que se presentaron en un gran centro de cuidados terciarios en India.

Material y métodos

Se realizó un cribado de ANCA en 1.289 pacientes mediante test de inmunofluorescencia directa (IIFT), realizándose la confirmación de los antígenos diana de ANCA mediante inmunoensayo lineal. La asociación entre IIFT y LIA fue determinada en VAA.

Resultados

Mediante IIFT, se detectó ANCA en el 13% de los pacientes (168 de 1.289), de los cuales, el 23,8% (40/168) fue positivo con el patrón P-ANCA, el 25% (42/168) fue positivo con C-ANCA y el 47,6% (80/168) reflejó un patrón atípico. En la evaluación con inmunoensayo lineal, el 6,7% (86/1.289) fue positivo, de los cuales, el 52,3% (45/86), 41,9% (36/86) y 8,8% (6/86) fueron positivos para anti-MPO, anti-PR3 y anti-GBM, respectivamente. En la granulomatosis eosinofílica con poliangitis (EGPA), en el 87,5% (7/8) de los casos, y en poliangitis microscópica (MPA/RLV) en el 91,3% (21/23), anti-MPO fue el anticuerpo predominantemente observado. En granulomatosis con poliangitis (GPA), el anticuerpo anti-PR3 fue predominante en el 87,5% (28/32) de los casos. De entre 168 muestras positivas de IIF, se observaron 8, 32, y 23 casos de EGPA, GPA y MPA/RLV, respectivamente.

Conclusiones

El objetivo primario del estudio fue aportar los datos de un único centro para determinar el diagnóstico de laboratorio de VAA. El resultado fue que la combinación de IIFT y LIA es una estrategia óptima para el diagnóstico de laboratorio de VAA.

Palabras clave:
Vasculitis asociada a ANCA (AAV)
Anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos (ANCA)
C-ANCA
P-ANCA. MPO

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